摘要:
本研究对蛇足石杉（Huperzia serrata）环阿屯醇合成酶（Cycloartenol synthase，CAS）基因HsCAS1编码区进行克隆及序列分析。根据本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据，从中获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的编码CAS的转录本，采用RT-PCR方法获得该基因的编码区序列，并对HsCAS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。利用实时荧光定量PCR方法检测HsCAS1基因在蛇足石杉的根、茎、叶中的表达情况。序列分析表明，所克隆的HsCAS1基因编码区长为2,271 bp，编码756 个氨基酸残基，HsCAS1与紫果冷杉（Abies magnifica）的CAS具有61%的序列相似性。生物信息学预测HsCAS1蛋白含有3个跨膜区，具有萜类环化酶等保守结构域，不含信号肽。HsCAS1在蛇足石杉的根中表达丰度高于茎和叶。本研究在国内外首次获得蛇足石杉HsCAS1基因的编码区序列，为进一步研究HsCAS1在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及鉴定酶活性位点奠定基础。
