金茹娜
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郭红
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徐静
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杜霄烨
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张腾
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陈瑜
2021, 23(1):108-116.
DOI: 10.11842/wst.20200326007
摘要:
目的 探讨三七总皂苷（Panax notoginseng saponins，PNS）对视网膜新生血管性病变进程中视网膜神经血管单元病理改变的干预效应和机制，为三七及三七皂苷制剂临床应用于相关视网膜病变的治疗提供部分实验和理论依据。方法 本课题采用氧诱导视网膜病变（Oxygen induced retinopathy，OIR）小鼠模型，将7天龄（Postnatal 7，P7）C57/BL6J小鼠根据体质量随机分为正常对照组（NC组），OIR模型组（OIR组）和PNS治疗组（PNS组），造模后从P12开始腹腔注射给药，根据不同的实验内容调整给药天数。于P7、P12、P19、P26和P33测量小鼠的体质量，于P19和P33应用小动物视网膜成像显微镜活体采集视网膜及血管图像，并定量分析；于P33应用全视网膜眼电图Ganzfeld ERG系统进行小鼠视网膜电图波形采集，对a波和b波振幅进行分析；于P46和P66将小鼠处死，取眼球制作眼杯，冰冻切片后进行胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein，GFAP）免疫组织化学分析；于P13和P15处死小鼠，取视网膜组织，采用Real-time PCR分析各组视网膜抗血管内皮生长因子A（Vascular endothelial growth factor A，VEGFA）、血管内皮细胞钙粘蛋白（Vascular endothelial-cadherin，VE-cadherin）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）的mRNA表达水平。结果 ① NC组、OIR组和PNS组的小鼠在生长发育中不同天龄的体质量无统计学差异（P > 0.05）。② P19 OIR组小鼠视网膜血管荧光素钠渗漏面积显著大于NC组（P < 0.05），而PNS组渗漏面积显著小于OIR组（P < 0.05）。③ P33 OIR组小鼠视网膜动脉迂曲指数（Retinal artery tortuosity index，RAT index）显著大于NC组（P < 0.05），而PNS组显著小于OIR组（P < 0.05）。④ OIR组小鼠b波振幅与NC组相比有统计学差异（P < 0.05）；PNS组b波振幅与OIR组相比有统计学差异（P < 0.05）。⑤ P46和P66 OIR组小鼠视网膜Müller细胞GFAP免疫阳性明显增强，并可达内核层和外核层，PNS组GFAP免疫阳性和NC组相近，未见GFAP的免疫阳性异常。⑥ P13和P15 OIR组小鼠视网膜中，PNS对VEGFA和IL-1β的mRNA水平无明显干预作用（P > 0.05），但可显著上调VE-cadherin mRNA水平（P < 0.05），显著下调TNF-α mRNA水平（P < 0.05）。结论 PNS对缺氧诱导的视网膜病变相关神经血管单元异常具有一定的干预效应，可能与其显著上调视网膜VE-cadherin的表达水平，下调TNF-α的表达水平有关。
