2022年第24卷第5期文章目次

  • 显示方式:
  • 简洁模式
  • 摘要模式
  • 1  植物2,3-氧化鲨烯环化酶的研究进展
    张斌 梁苗苗 谭政委 孙俊聪 薛哲勇
    2022, 24(5):36-44. DOI: 10.11842/wst.20211107017
    [摘要](110) [HTML](34) [PDF 778.46 K](156)
    摘要:
    三萜化合物是一类具有重要生物活性的天然产物,其生物合成途径受到极大的关注,在植物中它们都是由异戊二烯代谢途径,经过2,3-氧化鲨烯环化及羟基化和糖基化修饰产生,2,3-氧化鲨烯环化酶(OSC)催化底物环化生成三萜骨架是三萜结构多样和生物活性的基础。本综述对植物OSC基因的研究方法、克隆和功能鉴定、进化及酶结构和催化机制等各个方面的研究进展进行了综述,为植物三萜代谢途径解析,特别是OSC功能的研究提供了依据。最后,从酶挖掘、结构预测和定向进化三个方面展望了植物OSC今后的发展和突破。
    2  一种利用蜗牛酶转化重楼皂苷VI制备偏诺皂苷元的方法
    王亢宗 李敏 田济铭 张嘉颀 薛哲勇 宋伟 华欣
    2022, 24(5):45-56. DOI: 10.11842/wst.20211123010
    [摘要](57) [HTML](28) [PDF 6.77 M](137)
    摘要:
    目的 建立并优化一种利用蜗牛酶水解重楼皂苷VI制备偏诺皂苷元的转化方法。方法 利用体外酶促体系,使用蜗牛酶水解重楼皂苷VI制备偏诺皂苷元,通过高效液相色谱和核磁检测分离并鉴定产物结构。设计反应时间、酶用量、反应温度和pH值四个单因素,以转化率为考察指标,通过多项式回归及响应面法确定最优的反应条件。结果 通过单因素与正交实验,确定了实验室制备偏诺皂苷元的最优反应条件:反应温度为37°C、酶用量为1.5 mg(每100 μg底物),反应时间36 h,pH为5.35,模型预测产率为53.5%,验证产率为51.5%,与预期基本相符。结论 开发并优化了一种用蜗牛酶转化重楼皂苷VI制备偏诺皂苷元的方法,该方法可行性高,反应得率高,耗时短,成本低,可能对开展中试研究具有潜在的指导作用。
    3  刺五加提取物对人神经细胞SH-SY5Y氧糖剥夺再灌注损伤的保护作用研究
    王文杰 路娇娇 马凯丰 王凤格 马擎 华欣
    2022, 24(5):57-65. DOI: 10.11842/wst.20211115008
    [摘要](72) [HTML](36) [PDF 3.27 M](128)
    摘要:
    目的 研究一种刺五加提取物对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y氧糖剥夺再灌注(Oxygen and Glucose Deprivation/Reperfusion,OGD/R)后损伤的影响。方法 体外培养SH-SY5Y细胞,并分成空白对照组(Natural Control,NC)、氧糖剥夺再灌注模型组(OGD/R)、阳性对照组(80 μM 依达拉奉Edaravone+ OGD/R)、刺五加提取物中剂量组(500 μg·mL-1+ OGD/R)、刺五加提取物高剂量组(1000 μg·mL-1+ OGD/R)。其中,NC组给予DMEM/F12培养基培养,模型组给予氧糖剥夺6 h、复氧复糖再培养12 h处理。各组采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡水平,多功能酶标仪及荧光显微镜检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量(MDA)。结果 与模型组相比,刺五加提取物能显著降低OGD/R引起的SH-SY5Y细胞凋亡;降低活性氧及丙二醛水平,提高超氧化物歧化酶活力,提高胞内ATP水平。结论 刺五加提取物可通过抑制氧化应激、保护线粒体功能和抑制细胞凋亡来减轻SH-SY5Y细胞氧糖剥夺后再灌注损伤的作用。
    4  刺果甘草全基因组Survey及叶绿体基因组特征分析
    向如双 孙伟 段宝忠 王艳 Botir Khaitov 孟祥霄
    2022, 24(5):66-75. DOI: 10.11842/wst.20211115019
    [摘要](79) [HTML](18) [PDF 1.76 M](150)
    摘要:
    目的 基于基因组Survey分析对刺果甘草Glycyrrhiza pallidiflora Maxim.基因组大小和杂合率进行估计,并通过叶绿体基因组序列特征对其在甘草属Glycyrrhiza L.中的系统发育位置进行研究。方法 使用二代测序技术对刺果甘草进行测序,采用K-mer方法对测序reads进行分析,估算刺果甘草基因组大小和杂合率,使用生物信息学方法进行叶绿体基因组组装、注释和系统发育分析。结果 Survey分析结果显示其基因组大小约为577.82 Mb,杂合度约为0.31%,重复序列比例约为53.72%。叶绿体基因组长度为127,267 bp,不具有典型的四分体结构,总GC含量为34.32%,包含110个基因,其中76个蛋白质编码基因,30个tRNA基因和4个rRNA基因。系统发育分析表明,刺果甘草与圆果甘草G. squamulosa Franch.亲缘较接近。结论 刺果甘草存在低杂合和重复序列较多的特点,为了更好地对全基因组进行序列拼接和组装,可尝试采用三代测序结合二代测序的分析策略进行基因组组装;刺果甘草叶绿体全基因组比对和系统发育分析,为后续开展甘草属遗传多样性研究和分子鉴定标记筛选提供了重要依据。
    5  鸢尾糖基转移酶ItUGT797基因的克隆与表达分析
    姚薇 李静 黄梓璐 陶无恙 陈嘉杰 段礼新 季爱加
    2022, 24(5):76-86. DOI: 10.11842/wst.20210820005
    [摘要](63) [HTML](26) [PDF 2.45 M](132)
    摘要:
    目的 对川射干(Iris tectorum Maxim.)中可能参与黄酮类化合物生物合成的糖基转移酶基因ItUGT797展开初步研究,解析ItUGT797编码蛋白的各项生物信息指标并优化其原核表达体系。方法 提取鸢尾各组织部位的RNA并进行反转录获得cDNA文库,根据鸢尾转录组中ItUGT797基因序列设计基因特异性引物,通过同源克隆的方法构建pET-32a (+)-ItUGT797原核表达重组载体。使用各类生物信息学网站对测序后的ItUGT797序列进行理化性质、蛋白结构和进化关系等分析;实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)验证基因在各部位的表达情况;蛋白体外表达情况则使用大肠杆菌体系检测。结果 ItUGT797开放阅读框长度为1455 bp,编码蛋白分子量大小分别为53.80 kDa。ItUGT797在各组织中表达情况为花>叶>根茎。系统发育进化树表明,ItUGT797可能是具有7-O-糖基化活性的糖基转移酶。原核表达结果显示在诱导剂IPTG为0.1mM时,ItUGT797能够表达出较多的可溶性蛋白。结论 本研究成功从鸢尾中克隆了ItUGT797基因,并分析了其编码蛋白的特征,检测了基因在根茎、叶和花中的表达量,同时通过原核表达体系筛选出最适合该基因可溶性蛋白表达的诱导剂浓度,为后续探索其参与鸢尾中黄酮类成分生物合成的功能奠定理论基础。
    6  刺五加β-香树脂醇合酶基因的挖掘及功能验证
    李敏 王亢宗 李艳林 宋伟 郑宝江 徐志超 薛哲勇 华欣
    2022, 24(5):87-95. DOI: 10.11842/wst.20211122004
    [摘要](56) [HTML](31) [PDF 6.89 M](240)
    摘要:
    目的 刺五加三萜皂苷是我国传统中药刺五加的主要活性成分之一,具有抗炎、抗癌、抗疲劳、抗氧化等多种功效。但由于刺五加自然资源缺乏,难以满足对三萜皂苷的需求,急需寻求可持续资源利用新模式。目前,生物合成已成为植物次生代谢物积累的重要途径,为此,探寻出刺五加三萜皂苷的生物合成途径具有重要意义。方法 本文通过同源搜索和系统发育分析,预测并克隆了刺五加三萜皂苷合成途径中关键基因EsOSC5,并通过农杆菌介导的烟草瞬时表达实验,获得代谢产物;利用GC-MS检测其次生代谢产物并确定EsOSC5基因功能。结果 挖掘并克隆出片段大小为2286 bp的EsOSC5基因;EsOSC5基因转化烟草的瞬时表达实验及GC-MS次生代谢产物检测数据表明,β-香树脂醇为该基因的代谢产物。结论 EsOSC5基因可促进刺五加β-香树脂醇(三萜皂苷前体)的合成积累,该基因为刺五加β-香树脂醇合酶基因。
    7  艾活性成分生物合成调控相关的WRKY转录因子筛选及表达分析
    易小哲 王梦月 邬兰 刘霞 刘佳伟 农熠瑛 陈士林 师玉华
    2022, 24(5):96-109. DOI: 10.11842/wst.20211109011
    [摘要](84) [HTML](20) [PDF 2.23 M](183)
    摘要:
    艾(Artemisia argyi)是常用的中草药和灸用原料植物,具有重要的药用和经济价值,然而其药用活性成分的合成调控研究鲜有报道。WRKY转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,在植物生长发育、抗逆以及次生代谢合成调控等方面发挥重要作用。本研究基于转录组数据系统鉴定艾的WRKY家族转录因子,分析其蛋白理化性质、进化关系和保守基序等特性,并研究该家族基因在茉莉酸胁迫下的表达模式。实验结果表明,从转录组水平共鉴定到37个AarWRKY转录因子,其氨基酸数目为119-547个,分子量为13.4-59.8 kDa,理论等电点为4.86-10.03。根据拟南芥WRKY家族分类,34个AarWRKY蛋白归类在I、II、III三组,而3个蛋白未归类。AarWRKY蛋白均具有保守的WRKY结构域,且同一组蛋白具有相似的保守基序。基因表达谱分析以及利用qRT-PCR方法检测基因表达差异发现,外源茉莉酸甲酯处理后,6个AarWRKY基因的表达发生了显著差异,其中3个基因上调表达,3个基因下调表达。进一步蛋白互作网络预测发现这些差异表达的AarWRKY基因可能参与JA响应和萜类化合物的生物合成调控等途径。本研究为艾WRKY家族基因的功能研究及其在艾叶活性成分累积中的调控作用解析奠定基础。
    8  黄花蒿Dof基因家族鉴定及在GA-UV处理下对青蒿素生物合成的影响
    王星文 向丽 邬兰 马婷玉 尹青岗 师玉华
    2022, 24(5):110-122. DOI: 10.11842/wst.20211109010
    [摘要](53) [HTML](11) [PDF 3.10 M](133)
    摘要:
    目的 Dof(DNA binding with one finger)家族是高等植物中特有的一类转录因子家族,参与植物中光、激素、非生物胁迫等多种胁迫响应调控。本研究基于全基因组数据对黄花蒿Dof(AaDof)转录因子家族进行鉴定及表达模式分析,探究Dof家族基因在青蒿素合成调控中的作用。方法 经PFAM数据库鉴定获得AaDof序列,通过生物信息学软件分析其理化性质、亚细胞定位、基因结构、蛋白保守结构以及启动子序列结合元件等,并基于赤霉素(Gibberellic acid, GA)、紫外线B(UV-B)及二者协同胁迫下黄花蒿转录组数据对其表达模式进行分析。结果 本研究从全基因组水平共鉴定出51个AaDof基因,均含有保守的C2-C2单锌指结构,依据系统发育分析分为8个亚族,同一亚族内基因结构与蛋白保守结构域相对保守。亚细胞定位预测显示12个AaDof蛋白定位在细胞外,其余均定位在细胞核。启动子元件分析发现AaDof家族基因启动子区富含光、激素等多种响应元件。对AaDof在GA、UV-B和GA+UV-B处理下的表达模式分析发现,AaDof基因对GA胁迫处理响应较弱,仅有少量基因敏感,其表达主要受到UV-B胁迫影响。C1及C2.1亚族大部分基因在UV-B胁迫下上调表达,而A亚族大部分基因在UV-B胁迫下下调表达。qRT-PCR验证表明AaDof1AaDof17AaDof44在GA和UV-B处理下表达量显著上调,推测其可能通过参与GA和UV-B调控网络,正向调控青蒿素生物合成。结论 本研究系统鉴定了黄花蒿AaDof家族基因并筛选了3个可能正向调控青蒿素生物合成的候选AaDof基因,为黄花蒿Dof家族基因功能研究及其在青蒿素生物合成中的调控机制解析奠定基础。
    9  丹参SmCOP1与调控丹参酮和丹酚酸合成相关转录因子互作筛选
    邓淮钰 李倩 郭园艺 张骥骜 郭宏波 麻鹏达
    2022, 24(5):123-139. DOI: 10.11842/wst.20211110013
    [摘要](45) [HTML](23) [PDF 3.96 M](78)
    摘要:
    目的 预测分析并克隆丹参E3泛素连接酶SmCOP1(constitutively photomorphogenic1),并对其靶基因进行初筛,为丹参次生代谢关键调控因子MYB以及bHLH等转录因子泛素化研究做准备。方法 本研究利用拟南芥AtCOP1蛋白序列,用HMMER3程序和在线程序SMART,在丹参全基因组数据库筛选到丹参中的E3泛素连接酶SmCOP1序列,经RT-PCR技术获得丹参cDNA,以其为模板设计引物扩增,并利用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行相关分析。通过酵母双杂实验对其调控丹参酮和酚酸物质机制进行初步研究。结果 结果表明SmCOP1的2个蛋白均为不稳定亲水性蛋白,其N-端为环形锌指结构域(RING–finger),C-端为WD40重复结构域。通过建立进化树表明SmCOP1bAtCOP1是直系同源的关系,而SmCOP1aSmCOP1b是旁系同源的关系。Y2H实验显示SmCOP1a与SmPAP1互作。结论 成功克隆并预测分析丹参E3泛素连接酶SmCOP1,并初步发现其可能通过靶向MYB转录因子SmPAP1对其泛素化修饰参与调控酚酸类物质的代谢。
    10  乌拉尔甘草TIFY基因家族鉴定及调控分析
    秦振芬 孟祥霄 温东 朱雪雯 王艳 Botir Khaitov Atia tul Wahab 孙伟
    2022, 24(5):140-149. DOI: 10.11842/wst.20211116007
    [摘要](49) [HTML](23) [PDF 2.23 M](73)
    摘要:
    目的 为了探索乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)TIFY基因家族的特征并预测其功能,本研究在全基因组层面,应用生物信息学方法对乌拉尔甘草TIFY基因家族进行鉴定和分析。方法 在乌拉尔甘草全基因组数据基础上,利用NCBI、MEME及TBtools等工具,结合基因保守结构域,对乌拉尔甘草TIFY基因家族的序列特征、分类、系统发育和基因表达模式进行分析。结果 在乌拉尔甘草中鉴定到TIFY家族基因成员18个(GurTIFY1-GurTIFY18),分别属于TIFY、JAZ、PPD、ZML四个亚家族,编码的核苷酸长度为444-1266 bp,氨基酸长度在147-421 aa之间,等电点为4.57-9.68,分子质量为16741.11-44426.5 Da,含有10个保守基序和4个保守结构域。基因表达结果表明GurTIFY基因中GurTIFY15、GurTIFY4、GurTIFY1、GurTIFY11等在乌拉尔甘草叶和根中的表达水平具有显著差异性。结论 本研究为深入理解TIFY基因响应非生物胁迫的调控机制和参与次生代谢物质累积的功能奠定基础,并为乌拉尔甘草优质品种选育提供科学参考。
    11  基于UHPLC-MS/MS的药用植物内源性激素含量检测方法及黄花蒿不同器官激素的测定
    李姝诺 高守红 陈军峰 陈枭 崔莉莉 刘艳平 陈万生
    2022, 24(5):150-159. DOI: 10.11842/wst.20211110003
    [摘要](47) [HTML](29) [PDF 1.40 M](189)
    摘要:
    目的 激素是调控植物活性次生代谢产物合成途径的核心调控因子,内源激素结构多样、含量极低,检测难度高,缺乏高效、准确的检测方法。本研究利用超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术构建了对黄花蒿中茉莉酸、细胞分裂素、赤霉素、生长素、脱落酸等多类植物内源性激素高效定量检测方法。方法 使用Agilent Poroshell 120 EC-C18(2.7 μm, 3.0×150 mm)色谱柱,流动相为0.05%甲酸水-乙腈溶液,梯度洗脱,采用多反应监测模式验证方法可行性,并对黄花蒿不同器官中植物激素进行定量分析。结果 本方法中检测的16种植物激素均呈良好线性,加样回收率、精密度和稳定性均符合植物样品的测定要求。利用此方法测定青蒿不同器官的激素含量,结果表明脱落酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯均在叶中含量较高,赤霉素和生长素在根部含量高,细胞分裂素在叶和茎中含量高。结论 青蒿不同器官的激素测定结果可进一步印证脱落酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯在调控青蒿素合成中起着重要作用的相关报道,同时表明该方法检测性良好。本文构建的植物内源性激素的检测方法为进一步探究植物生长发育、抵御外界胁迫的相关机制及次生代谢产物的合成等方面提供了手段。
    12  珊瑚菜抗盐相关基因GlERF11克隆与盐胁迫表达分析
    2022, 24(5):160-169. DOI: 10.11842/wst.20220205002
    [摘要](36) [HTML](18) [PDF 9.77 M](130)
    摘要:
    目的 鉴定珊瑚菜抗盐基因GlERF11并分析其在盐处理下的表达量变化。方法GlERF11基因进行全长克隆以及生物信息学分析,使用荧光定量PCR方法对GlERF11基因进行定量表达分析。结果 GlERF11基因cDNA全长1019 bp,开放阅读框全长537 bp,编码178个氨基酸。生物信息学分析显示,GlERF11蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构域,相对分子质量为19710.95 Da,包含AP2超家族保守结构域。系统进化树分析显示,GlERF11蛋白与伞形科植物胡萝卜ERF11蛋白亲缘关系较近。荧光定量分析显示,珊瑚菜幼苗的GlERF11基因受盐胁迫影响后表达量均有所提高,处理后12 h变化最为显著。结论 本研究针对珊瑚菜抗盐相关基因GlERF11开展生物信息学分析,研究为珊瑚菜品种改良以及育种提供了重要的理论基础与思路。
    13  丹参酮生物合成相关SmERF108转录因子的鉴定及其靶基因分析
    卢芷梅 季爱加
    2022, 24(5):170-179. DOI: 10.11842/wst.20211116021
    [摘要](58) [HTML](17) [PDF 1.79 M](127)
    摘要:
    目的 鉴定与丹参酮合成相关转录因子AP2/ERF家族中SmERF108转录因子,并分析转录因子SmERF108的靶基因。方法 利用生物信息学在线分析平台如NCBI、PFAM等分析SmERF108的序列特征;MEGA-X软件用于构建SmERF108与不同功能转录因子的系统进化树;拟南芥原生质体转化法鉴定SmERF108蛋白的亚细胞定位;通过实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)对SmERF108基因在丹参不同器官和组织差异表达进行检测;利用酵母体系对SmERF108的转录激活活性进行探究并用酵母单杂技术确定其靶基因。结果 SmERF108具有典型的AP2/ERF保守结构域,属于ERF-B3亚组,系统进化树和保守基序分析显示SmERF108与丹参中SmERF128、青蒿中AaERF2亲缘关系较近且保守基序分布一致;亚细胞定位显示SmERF108蛋白定位于细胞核;SmERF108基因在周皮中表达最高,且呈现周皮(R1)>韧皮部(R2)>木质部(R3)的规律;酵母自激活验证SmERF108具有转录激活活性,同时酵母单杂交确认其能与关键酶基因SmCPS1启动子结合。结论 鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF108,生物信息学分析及差异表达分析预测与丹参酮合成相关,分子互作初步证实靶基因为SmCPS1二萜环化酶。
    14  miRNA调控NF-?B通路干预溃疡性结肠炎相关癌变及中医药作用研究进展
    刘佳丽
    2022, 24(5):180-186. DOI: 10.11842/wst.20210508003
    [摘要](50) [HTML](23) [PDF 596.76 K](170)
    摘要:
    溃疡性结肠炎是常见的肠道慢性炎症反应,溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis related colorectal cancer, UCRCC)呈逐年上升,现已成为溃疡性结肠炎患者死亡的重要原因,其发生主要是持续的炎症反应刺激肠道黏膜, 最终导致癌变的发生。NF-κB通路是诱导机体肿瘤细胞及血管内皮细胞增生、迁移、侵袭及抑制细胞凋亡的重要因素。近年来发现中医药在治疗UCRCC的作用机制可能与抗炎和抗氧化活性,抑制炎性细胞因子相关,中医药调控UCRCC的分子机制与miRNA调控NF-κB通路存在相关性。故本文就miRNA调控NF-κB通路干预UCRCC之间关系及中医药的作用进行综述。
    15  中药有效成分对膀胱癌信号通路的调控作用
    王思宇 王宇
    2022, 24(5):187-195. DOI: 10.11842/wst.20210705017
    [摘要](56) [HTML](22) [PDF 1.01 M](97)
    摘要:
    膀胱癌是泌尿系统的常见恶性肿瘤。近年来,中药抗癌引起了研究者的广泛关注,大量研究证实中药有效成分可以抑制膀胱癌细胞的生长、增殖、迁移和侵袭、阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。研究表明:中药有效成分对膀胱癌的治疗作用可以通过调控信号通路实现,主要包括磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositide 3-kinases, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)信号通路(如:黄芩素、姜黄素、青蒿素、青藤碱、氧化苦参碱、红景天苷、枸杞多糖、毛蕊异黄酮、蒲公英萜醇等)、核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)信号通路(如:隐丹参酮、荭草素、白藜芦醇、姜黄素、蛇床子素、大黄素、紫铆因、猪苓多糖等)、分泌性糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)信号通路(如:二氢丹参酮、汉防己碱、汉防己丙素等)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路(如:丹参酮ⅡA、和厚朴酚、黄芩素、芒柄花黄素、苦豆碱、槲皮黄酮等),以及Janus激酶(Janus kinases, JAK)/信号转导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription, STAT)信号通路(如:黄芩素、白花蛇舌草等)。相关中药有效成分的类别主要包括黄酮类、生物碱类、多酚类、萜类等,多来源于黄芩、姜黄、黄芪、防己、丹参及大黄等中药材。本文总结了近几年不同中药有效成分对膀胱癌信号通路的调控作用并展望中药用于治疗膀胱癌的应用前景。
    16  140例Ⅲ期结直肠癌术后患者症状负担及中医症状群研究
    任似梦 吴晓月 韩宝瑾 金嘉悦 张文政 刘杰
    2022, 24(5):196-201. DOI: 10.11842/wst.20220112018
    [摘要](48) [HTML](17) [PDF 585.96 K](176)
    摘要:
    目的 探讨Ⅲ期结直肠癌(Colorectal Cancer, CRC)术后患者症状负担及中医症状群分布。方法 使用2010年8月至2013年8月期间从中国中医科学院广安门医院等国内10家三甲医院收集的Ⅲ期结直肠癌术后患者的临床资料进行分析。采用中医证候评分表进行症状评估,描述统计及探索性因子分析探讨症状负担及中医症状群分布。结果 在140例Ⅲ期结直肠癌术后患者中,症状发生率前5位的症状依次是神疲乏力(79%)、大便规律改变(65%)、腹胀(59%)、疼痛(57%)、胁肋胀痛(53%),44%的患者存在2个及以上症状评分≥2分的症状。探索性因子分析提取4个症状群,分别为气虚症状群、阳虚症状群、气滞症状群、排泄相关症状群,累积方差贡献率为67%。结论 Ⅲ期结直肠癌术后患者症状发生率高,同时存在多个症状共表达。不同症状相互关联形成多种症状群,值得进一步研究与中医证候之间的关系。
    17  基于数据挖掘探讨虫类药治疗肝癌的用药规律
    王艺 张振 田莎 邓哲 童东昌 冯婷 田雪飞
    2022, 24(5):202-209. DOI: 10.11842/wst.20210517010
    [摘要](80) [HTML](28) [PDF 1.29 M](133)
    摘要:
    目的 初步分析虫类药治疗肝癌的用药规律。方法 从中国知网、万方数据库、维普数据库检索筛选出含虫类药治疗肝癌的处方,利用中医传承辅助平台(V2.5)分析其用药规律。结果 筛选出186首治疗肝癌的含虫类药处方,涉及中药221味,其中虫类药35味,高频虫类药为鳖甲、牡蛎、土鳖虫等;虫类中药多与补虚类药、解毒类药、化瘀类药、化湿类药、理气类药等配伍使用,处方中常用虫类药药味数为1-3味,药性以寒、温、平为主,五味以咸、甘为主,近1/3的虫类药均有毒性,主入肝、肾、心、胃、脾经。获得使用频次≥20次的常用含虫类药物药对47对,药物关联规则20条。基于复杂系统熵聚类分析,得到含虫类药物新方核心组合12个,治疗肝癌的候选新处方6个。结论 运用含虫类处方治疗肝癌常用鳖甲、牡蛎、土鳖虫等虫类药,其疗效确切、效专力猛,多与益气健脾、利水渗湿等功效的药物联用,契合病机,体现了肝癌扶正祛邪之大法,为临床用药提供一定的参考和借鉴。
    18  C57BL/6和ICR品系小鼠在大脑中动脉栓塞(MCAO)模型中差异的研究
    郑晓宇 宋文婷 李磊 曹慧 姚明江 刘建勋
    2022, 24(5):210-217. DOI: 10.11842/wst.20210610007
    [摘要](57) [HTML](23) [PDF 2.74 M](94)
    摘要:
    目的 探讨C57BL/6与ICR小鼠在大脑中动脉栓塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)中的品系间差异。方法 设C57BL/6正常组和ICR正常组为5只,C57BL/6模型组和ICR模型组分别设10只,模型组采用相同的MCAO方法进行造模,观察每组小鼠体重变化率、神经行为学、脑指数、脑含水量、脑梗死面积、生存率。结果 ①C57BL/6与ICR小鼠分别于术前和脑缺血后24 h进行统计,体重变化率具有显著的统计学差异(P<0.01);②C57BL/6与ICR小鼠的生存率分别为90.91%和72.72%;③C57BL/6与ICR小鼠的神经行为学评分无显著的统计学差异;④C57BL/6与ICR小鼠的脑指数分别为1.91%±1.34%、2.06%±1.76%,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05);⑤C57BL/6与ICR小鼠的脑含水量分别为82.32%±1.34%、85.83%±1.76%,两组间具有显著的统计学差异(P<0.01);⑥C57BL/6与ICR小鼠的脑梗死面积分别为13.85%±4.32%、28.18%±8.29%,两组间具有显著的统计学差异(P<0.01)。结论 采用相同的MCAO造模方法均可成功制作大脑中动脉栓塞模型,但在C57BL/6与ICR小鼠间存在较为显著的品系间差异。
    19  凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响
    李薇懿 李国春
    2022, 24(5):218-228. DOI: 10.11842/wst.20210604003
    [摘要](42) [HTML](24) [PDF 5.14 M](158)
    摘要:
    目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响,对差异表达的miRNA靶基因进行分析,探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组(B)和实验组(C)。适应性饲养一周后,C组灌胃凉血通瘀方,B组灌胃等体积生理盐水,连续5天,每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织,借助全转录组测序技术获得miRNA表达量,与miRBase数据库比对获取已知miRNA,使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2,筛选阈值为|log2FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测,对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比,共发现21个显著差异表达的miRNA,上调有9个,下调有12个,共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现,生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位,神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示,靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件,根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响;显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。
    20  针刀松解“三合阳”对KOA模型兔膝关节IL-1β、IL-10、TNF-α的影响
    孙季维 王荣国 李园源 侯逸敏 魏嘉碧 柴玉卓 张雨晴
    2022, 24(5):229-237. DOI: 10.11842/wst.20220307004
    [摘要](56) [HTML](16) [PDF 3.25 M](176)
    摘要:
    目的 从抗炎方面探讨针刀松解膝骨关节炎模型兔“三合阳”保护关节软骨,改善膝关节功能的相关机制。方法 36只健康新西兰兔取12只作为空白组,其余24只采用碘乙酸钠(sodium iodoacetate, MIA)建立兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)模型,2周后,造模成功的新西兰兔随机分为模型组、针刀组,每组12只。针刀组松解“三合阳”进行治疗,每3天1次。分别于治疗2周、4周后对各组行骨关节炎严重程度指数(Lequesne MG)评分,依据X线结果行K-L(Kellgren-Lawrence)评分,取材后观察膝关节大体情况,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining, HE)染色后对关节软骨进行Mankin’s评分,酶联免疫吸附法(ELISA)检测关节液中白介素-10(interleukin-10, IL-10)的水平,免疫印迹法(Western Blot, WB)和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-PCR)法检测软骨组织中白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α)的蛋白和mRNA表达。结果 造模第4周、第6周后,模型组较空白组Lequesne MG评分、K-L评分、Mankin’s评分、关节软骨中IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P < 0.01),关节液IL-10蛋白表达水平显著降低(P < 0.01);针刀组较模型组Lequesne MG评分、K-L评分、Mankin’s评分、关节软骨中IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P < 0.05, P < 0.01),关节液中IL-10蛋白表达水平显著升高(P < 0.05, P < 0.01)。结论 针刀松解“三合阳”可纠正KOA模型兔膝关节力学失衡,下调关节软骨中IL-1β、TNF-α的表达以减轻炎症反应,上调关节液中IL-10的表达以抑制炎症相关因子释放,保护关节软骨,改善膝关节功能。
    21  连梅汤对糖尿病模型小鼠血糖和肠道菌群的影响
    Jiangguangkun
    2022, 24(5):238-246. DOI: 10.11842/wst.20210726004
    [摘要](42) [HTML](22) [PDF 4.82 M](121)
    摘要:
    目的 研究连梅汤(Lianmei Decoction,LMT)对2型糖尿病(T2DM)的治疗作用。方法 将C57BL/6J设为空白组、db/db糖尿病小鼠分为对照组,二甲双胍组,连梅汤低、中和高剂量组。收集不同组别小鼠的血清进行肝功能相关指标TC、AST、ALT、HDL-c、LDL-c和TG检测,验证连梅汤对小鼠血糖和血脂的调节作用,最后对实验小鼠粪便进行16SrDNA测序。结果 db/db小鼠与C57BL/6J比较血糖和血脂显著升高,研究模型出现T2DM。实验结果表明,在连梅汤的治疗下,与C57BL/6J小鼠比较,连梅汤对血糖、血清中FFA、血清中INS均有一定的抑制作用。db/db糖尿病小鼠TC、AST、ALT、HDL-c、LDL-c和TG在治疗组都有趋于正常的趋势,且在低剂量治疗组的治疗效果优于阳性药物二甲双胍。HE染色显示连梅汤不同剂量治疗组结肠未见明显病理改变。肠道菌群结果显示,连梅汤能够显著提高拟杆菌和降低厚壁菌门的丰度。虽然连梅汤在属水平降低了肠道微生物的相对丰度,但是却扩大了肠道微生物的总群多样性。结论 该研究证明了连梅汤可能通过影响肠道菌群对db/db糖尿病小鼠的肝脏功能和血糖血脂具有一定的调节作用,为连梅汤的临床治疗提供了一定的理论依据。
    22  黄连NRAMP5基因的克隆与生物信息学分析
    王文斌 朱海兰 莫静 胡志刚 汪波
    2022, 24(5):247-254. DOI: 10.11842/wst.20210607005
    [摘要](51) [HTML](21) [PDF 4.41 M](102)
    摘要:
    目的 获得并分析黄连(Coptis chinensis Franch.)中自然抗性相关巨噬细胞蛋白(Natural Resistance-Associated Macrophage Protein,NRAMP)的编码基因。方法 根据黄连基因组测序结果中的NRAMP基因序列设计特异性引物,经PCR扩增得到黄连NRAMP5编码序列,进行TA克隆、测序及生物信息学分析。结果 得到黄连NRAMP5 cDNA序列,全长1611bp,编码536个氨基酸,通过与Genbank上的其他蛋白序列比对,将其命名为CcNRAMP5;序列分析表明黄连NRAMP5基因编码的氨基酸序列包含一个典型的NRAMP结构域(PF01566),是一种拥有11个跨膜结构域,亚细胞定位于质膜处的膜蛋白,具有疏水性强的特点。二级结构中肽链构象主要包括α-螺旋与无规则卷曲两部分;三级结构模型具有葡萄球菌锰转运突变体(MntH)的晶体结构。通过系统进化关系分析推测其可能具有二价金属离子转运功能。结论 首次通过克隆得到黄连NRAMP5基因,并运用生物信息学方法对其理化性质、结构特征等进行了分析预测,这些结果将为黄连NRAMP5基因的功能研究以及其对镉转运的调控机制提供理论依据。
    23  日本汉方药企业近十年申请专利的分析及思考——以津村制药和Kracie为例
    刘岳琪 宿军慧 曹君杰 王雅雯 谷洪顺 乔延江 徐冰
    2022, 24(5):255-265. DOI: 10.11842/wst.20210620007
    [摘要](73) [HTML](96) [PDF 1.28 M](137)
    摘要:
    目的 对日本医疗用汉方医药品和一般用汉方医药品市场占有率最大的企业日本津村制药公司和Kracie制药公司2008-2020年间申请的专利内容进行综述,为国内中药经典名方和保健食品研发、知识产权保护提供参考。方法 通过日本专利局的官方检索渠道J-PlatPat平台,检索日本津村制药公司和Kracie制药公司在2008年至2020年间申请的专利,并进行专利布局和技术内容分析。结果 共收集43项日本津村制药公司特许和实用新案专利,其围绕汉方制剂产品全过程质量控制构建了坚实的专利技术体系;共收集52项Kracie制药公司特许和实用新案专利,其致力于功能性制剂和组合物的开发,重点在生活改善、老龄化和癌症等领域进行专利布局,还创建了多种产品功效和功能的客观评价方法。结论 津村制药近十年专利布局提示在中药现代化制造和走向国际的过程中,应把提高品质作为主攻方向,树立持续质量改进理念,完善产品有效性证据链。Kracie制药公司践行的以人为中心的汉方药设计理念,以及精准满足消费者健康需求的研发模式值得借鉴。
    24  基于网络药理学的银杏叶提取物防治老年性聋的作用机制研究
    王青玲 张梦娴 郭向东
    2022, 24(5):266-277. DOI: 10.11842/wst.20210714019
    [摘要](63) [HTML](27) [PDF 9.73 M](316)
    摘要:
    目的 基于网络药理学研究银杏叶提取物防治老年性聋的的潜在作用机制,并通过动物实验进行初步验证。方法 运用中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选银杏叶的有效成分,GeneCards数据库获得老年性聋相关靶点基因,微生信对基因本体论(GO)、基因组百科全书(KEGG)进行功能富集,Cytoscape3.8.2构建疾病-靶点-通路网络图。采用D-半乳糖诱导SD大鼠制备老年性聋的动物模型,腹腔注射低、中、高剂量(10、20、30 mg·kg-1)的银杏叶提取物,运用免疫荧光染色耳蜗基底膜铺片观察毛细胞形态变化;透射电子显微镜观察螺旋神经节细胞及线粒体超微结构变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清谷胱甘肽S转移酶(GST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)含量;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax比值变化。结果 GO富集主要涉及细胞衰老、过氧化物酶成分、氧化还原酶的活性等;KEGG富集相关性较高的通路包括细胞凋亡通路和氧化应激相关的谷胱甘肽代谢通路,与凋亡相关的靶点基因包括:Bcl-2、Bax、AKT1、TNF等;与谷胱甘肽代谢相关靶点基因涉及到:GSTP1、GSTM1等。动物实验证实银杏叶提取物可减轻毛细胞丢失,降低螺旋神经节细胞及线粒体损伤,提高GST、T-SOD含量,降低MDA含量,上调Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,下调Bax表达。结论 银杏叶提取物可能通过Bcl-2/Bax通路减轻耳蜗螺旋神经节细胞和毛细胞的氧化应激和细胞凋亡来延缓老年性聋的进程。
    25  基于整合药理学策略及药效验证探讨交泰丸抗心律失常分子机制
    陈金红 樊博雅 梁嘉钰 刘志超 丛紫东 李晓凤 杜武勋
    2022, 24(5):278-287. DOI: 10.11842/wst.20210707008
    [摘要](65) [HTML](26) [PDF 2.84 M](202)
    摘要:
    目的 从分子水平探究交泰丸治疗心律失常的作用机制。方法 ①采用中医药整合药理学研究平台(Integrative Pharmacology-based Research Platform of Traditional Chinese Medicine, TCMIP)V2.0,检索并获取黄连和肉桂活性成分、靶标,以及心律失常疾病和证候靶标信息,借助平台构建“中药-证素-疾病-靶标-通路”多维网络,获得药物干预疾病的关键靶标,通过基因本体数据库(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书库(Kyoto Encyclopaedia of Genes and Genomes,KEGG)进行富集分析,预测交泰丸治疗心律失常的分子机制。②选取雄性SD大鼠32只,随机分为对照组(N)、模型组(M)、交泰丸组(J)、阳性药组(Meto)4组,以尾静脉推注肾上腺素(Epi)制造心律失常模型,利用酶联免疫吸附法(ELISA)观察各组大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、儿茶酚抑素(CST)、神经肽Y(NPY)的含量。结果 ①交泰丸共筛选出23个活性成分(黄连14个,肉桂9个),心律失常相关靶标850个。这些活性成分通过调控基因表达的正调控、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联激活、信号识别颗粒(signal recognition particle,SRP)依赖的共翻译蛋白靶向膜、细胞因子介导的信号通路、调节心室心肌细胞动作电位、通过心脏传导调节心率等生物过程,直接或间接参与促红细胞生成素激活肾素-血管紧张素系统(RAS)、加速纤维肉瘤蛋白(rapidly accelerated fibrosarcoma,RAF)激活等信号通路,从而发挥抗心律失常的作用。②模型组大鼠血浆AngⅡ、CST、NPY含量明显高于对照组(P<0.01),交泰丸组AngⅡ、CST、NPY水平与模型组比较明显下降(P<0.05或P<0.01),且交泰丸组疗效优于阳性药组。结论 通过整合药理学策略结合药效验证,揭示了交泰丸多途径抗心律失常作用的分子机制,验证了RAS系统与交感神经活性在心律失常中的重要作用,并明确交泰丸对心律失常有一定的调节作用,疗效确切。
    26  芪参益气滴丸对AopE基因敲除小鼠动脉粥样硬化中Th17细胞的作用及其网络药理学靶点分析
    张博承 彭立 许滔 郭磊磊 谢静 周玉萍 骆胤尧 肖琼艳 杨双双 巫廷春 殷念念
    2022, 24(5):288-298. DOI: 10.11842/wst.20210611004
    [摘要](45) [HTML](19) [PDF 4.09 M](167)
    摘要:
    目的 探讨芪参益气滴丸对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化中Th17细胞的作用及基于网络药理学的靶点分析。方法 选择芪参益气滴丸有效成分作为目标化学成分,输入其化学结构至MetaDrug预测软件,按照口服利用度、类药性为筛选条件对化合物进行筛选,通过逆向分子对接,进而找到相对应的靶标,构建芪参益气滴丸有效成分—Th17细胞靶标网络。将ApoE-/-小鼠分为三组,给予高脂喂养和不同剂量芪参益气滴丸干预,8周后比较动脉粥样硬化损伤面积,并检测芪参益气滴丸有效成分—Th17细胞靶标蛋白的表达。结果 芪参益气滴丸有效成分包括黄芪甲苷、三七皂苷R1、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮、刺芒柄花素7-羟基-4'-甲氧基异黄酮,各成分最终靶点数量分别为114、29、28、25、17、13、29、35、31、14、21。25个与Th17细胞分化相关蛋白被确认为靶点蛋白,多条信号通路参与了芪参益气滴丸干预Th17细胞分化过程。组织病理学分析证实芪参益气滴丸可显著减少动脉粥样硬化损伤面积。蛋白印迹实验验证了芪参益气滴丸可以调节TGF-β信号通路、JAK/STAT信号通路中的关键蛋白。结论 芪参益气滴丸可通过干预TGFβ信号通路和JAK/STAT信号通路、减少Th17细胞分化、抑制动脉粥样硬化。
    27  七叶一枝花甾体皂苷种类及含量差异研究进展
    彭寿杰 崔志莹 王一博 徐福荣 赵艳丽 李世昌
    2022, 24(5):299-310. DOI: 10.11842/wst.20210822002
    [摘要](57) [HTML](70) [PDF 2.08 M](203)
    摘要:
    重楼是我国传统的名贵中药,七叶一枝花为历版《中国药典》收载的重楼药材两个基原植物之一,具有清热解毒、消肿止痛、活血化瘀等功效,其主要活性成分为甾体皂苷类物质。由于重楼市场需求量剧增和七叶一枝花成药时间较长,导致大量依靠人工种植。然而,人工种植过程中产地、采收年限和采收月份都会影响七叶一枝花的甾体皂苷含量。本文系统地总结了七叶一枝花中主要活性成分甾体皂苷的种类,以及不同产地、不同生长年限及不同采收月份的七叶一枝花根茎中甾体皂苷含量差异的研究现状,以期为进一步研究七叶一枝花品质差异、野生资源驯化及规范化种植提供参考。
    28  基于经典胰岛素传导及炎症信号通路的相互作用中药改善胰岛素抵抗作用研究进展
    魏颖 苏秀兰 徐暾海
    2022, 24(5):311-319. DOI: 10.11842/wst.20210715002
    [摘要](62) [HTML](47) [PDF 854.05 K](122)
    摘要:
    胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)是2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)最主要的发病机制之一。治疗T2DM的关键就是改善机体IR的状态。中医药在改善IR方面有其得天独厚的优势,近年来越来越多的医学工作者开始关注中医药在T2DM改善IR方面的作用,对其分子机制方面的研究也越来越深入。鉴于胰岛素抵抗与慢性低度炎症之间错综复杂的关系,本文基于经典胰岛素传导及炎症信号两大类通路,从中药活性成分、提取物以及中药复方三个方面综述了近十年中药在改善IR的相关研究,旨在为中药治疗T2DM、改善IR的研究与治疗提供借鉴并为进一步的深入研究打下坚实的基础。
    29  哺乳动物AQPs亚型、分布、功能及中医药调节AQPs防治临床疾病的研究进展
    张欣欣 刘红宁
    2022, 24(5):320-327. DOI: 10.11842/wst.20210614006
    [摘要](54) [HTML](25) [PDF 700.01 K](156)
    摘要:
    水通道蛋白一族是位于细胞膜上具有特异性、选择性、高效性的一种以转运水液为主的水孔蛋白,其主要表达于液体吸收分泌相关的内皮细胞及上皮细胞中,参与维持体液的动态平衡,对机体正常的生命活动和生理功能有重要作用,很多疾病的发生、发展和预后都与之失常有关。近年来随着科技进步和研究深入发现,中医水液代谢与水通道间存在着密不可分的关系,因此利用中医药调节AQPs的表达将为临床疾病的治疗提供新靶点和新思路。本文主要对水通道蛋白的亚型、分布、功能及中医药调节AQPs防治临床疾病的研究进展进行综述。
    30  补肾活血方对肺成纤维细胞IL-17A、LC3-Ⅱ影响的实验研究
    晓明 李芮 高善语
    2022, 24(5):328-337. DOI: 10.11842/wst.20210524006
    [摘要](82) [HTML](27) [PDF 4.38 M](167)
    摘要:
    目的 探讨补肾活血方对人胚肺成纤维细胞的作用机制。方法 首先,观察不同浓度的含药血清对人胚肺成纤维细胞的抑制情况及细胞内的胶原蛋白的含量,确定出实验用含药血清的最佳血药浓度;其次,应用TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞,将实验细胞分为空白对照组,TGF-β1处理组,TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h组(含药血清组),TGF-β1处理+基因敲除阴性对照组(sh-NC组),TGF-β1处理+IL-7A基因敲减组(sh-IL-17A组),TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+过表达质粒阴性对照组(Vector组),TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+IL-17A过表达质粒组(IL-17AOE组),进行相应药物培养后,检测各组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A表达量的变化。结果 TGF-β1处理组中人胚肺成纤维细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较空白对照组明显增多(P<0.05);含药血清组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较TGF-β1处理组明显较少,而自噬小体的数量较TGF-β1处理组明显增多;sh-IL-17A组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较sh-NC组明显较少,而自噬小体的数量较sh-NC组明显增多;IL-17AOE组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A mRNA等各项指标较Vector组明显增多,而自噬小体的数量较Vector组明显减少。结论 补肾活血方可以对MRC-5细胞中的胶原显著降解。这一作用与抑制IL-17A介导的通路,激活细胞自噬,进一步降解胶原蛋白有关。
    31  液质联用技术联合网络药理学探讨白鲜皮治疗湿疹的作用机制
    徐华
    2022, 24(5):338-348. DOI: 10.11842/wst.20210608003
    [摘要](43) [HTML](33) [PDF 6.62 M](211)
    摘要:
    目的 采用液质联用技术分析白鲜皮中的主要化学成分;基于网络药理学技术研究白鲜皮治疗皮肤湿疹的活性成分、作用靶点及作用机制。方法 利用液质联用技术(LC-MS)对白鲜皮主要成分进行分析,通过质谱数据结合文献资料,对各主要成分进行快速识别;通过利用SwissADME数据库对白鲜皮潜在活性成分进行预测,筛选主要作用靶点。进行KEGG通路富集分析,最终得到白鲜皮成分-靶点-疾病-通路网络图。采用分子对接技术对主要成分和作用靶点进行验证。结果 从白鲜皮中共分析鉴定了12种成分,进一步筛选得到4种潜在活性成分,可作用于48个关键靶点和14条主要通路。结论 采用LC-MS技术结合网络药理学方法,可以快速分析白鲜皮的潜在活性成分,并初步揭示了成分-靶点-通路之间的关系。通过分子对接技术可以做作用靶点进行验证。
    32  卵巢早衰的中医病机及其方剂现代药理探索
    崔楠 杨琪 杨亚楠 王晓甜 王海霞 邓楹君 黄欲晓
    2022, 24(5):349-355. DOI: 10.11842/wst.20211127010
    [摘要](44) [HTML](28) [PDF 624.47 K](100)
    摘要:
    卵巢早衰是40岁以下妇女常见的妇科疾病,主要以闭经、高促性腺激素和低雌激素为特征。近年来,卵巢早衰的发病率逐年升高而且呈年轻化趋势。而到目前为止,还没有完全治愈卵巢早衰的方法。研究发现中医药治疗卵巢早衰有独特优势,其可能的机制涉及调节生殖内分泌激素、参与免疫调节、抑制细胞凋亡、调控相关细胞因子及信号通路等途径。因此,本文以卵巢早衰的中医发病病机及其部分方剂现代药理研究成果为中心进行探讨。
    33  异绿原酸C大鼠体内代谢产物鉴定
    邓志鹏
    2022, 24(5):356-363. DOI: 10.11842/wst.20210705005
    [摘要](48) [HTML](16) [PDF 2.00 M](144)
    摘要:
    目的 分析大鼠灌胃给予异绿原酸C(4,5-二咖啡酰奎宁酸)后粪便、尿液及血浆内存在的代谢产物并推测其在大鼠体内的代谢途径。方法 大鼠按20 mg·kg-1一次性灌胃给予异绿原酸C后,收集不同时间(段)的粪便、尿液及血浆,采用超高效液相色谱与Q-Exactive Plus Orbitrap 高分辨质谱技术(UPLC-Q-Exactive Plus Orbitrap MS)+质谱自带的软件联合的方法分析,对生物样品进行检测,并完成鉴定其代谢产物。结果 基于总离子流色谱图和一级二级质谱提供的分子离子和碎片离子等精确信息,最终从大鼠粪便、尿液和血浆中共发现11种成分,包括1个原型和10个代谢产物,涉及的代谢途径有水解、甲基化、氧化、还原、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化等。结论 本实验建立的分析方法检测快速、结果准确、灵敏度高,符合生物基质样品分析相关要求,适用于大鼠粪便、尿液和血浆中异绿原酸C代谢产物的分析,为异绿原酸C的药效作用机制及药动学研究提供一定参考价值。
    34  基于不同数据类型的隐结构模型在中医研究中的应用与进展
    宋佳 王至婉
    2022, 24(5):364-369. DOI: 10.11842/wst.20210808008
    [摘要](48) [HTML](40) [PDF 572.08 K](93)
    摘要:
    隐结构模型是一种特殊的聚类分析方法,可对临床收集的无监督数据进行多维聚类划分,能直观地显示出数据间的关系、揭示数据间的隐藏规律,近年来在中医研究中应用广泛,其研究结果为中医临床辨证论治提供了客观的依据。但因其分析过程复杂,对样本数据要求严谨,在一定程度上限制了其在中医研究中的应用。本文从既往的研究结果入手,基于不同数据类型对隐结构模型在中医研究中的成果进行分类总结,着重论述了隐结构模型对不同类型数据的研究内容和适用性,以及隐结构模型联合其他数据分析方法的应用,并对其中存在的问题进行总结与思考,为隐结构模型对不同类型数据的分析应用以及中医量化研究提供思路和借鉴。
    35  从“能量饥饿”学说探讨扩张型心肌病气虚血瘀治疗进展
    李巧稚 王振涛 郭宗耀
    2022, 24(5):370-375. DOI: 10.11842/wst.20210508004
    [摘要](55) [HTML](30) [PDF 575.42 K](121)
    摘要:
    扩张型心肌病(Dilated cardiomyopathy,DCM)临床表现为进行性心力衰竭,“能量饥饿”学说认为心脏衰竭的原因与心肌能量供需失衡有关,为心脏提供额外能量以缓解心脏“饥饿”状态成为优化心肌能量代谢治疗的新靶点。气虚血瘀与“能量饥饿”关系密切,益气升陷活血类中药多靶点、多途径调节心肌能量代谢,为心肌细胞提供更多能量物质,缓解心脏的“饥饿”状态,缓解心力衰竭进程。本文总结近几年益气升陷活血中药治疗DCM“能量饥饿”状态的研究,从“能量饥饿”学说探讨DCM气虚血瘀治疗的最新进展,为优化DCM心肌能量代谢治疗提供新思路。
    36  中医领域内关于孤独症谱系障碍的研究现状及未来趋势分析-基于CiteSpace和VOSviewer的可视化分析
    薛雅若 鲍超 陈栋 李建兵 李彦彩
    2022, 24(5):376-386. DOI: 10.11842/wst.20220112008
    [摘要](66) [HTML](23) [PDF 5.36 M](171)
    摘要:
    目的 分析自1997年起国内中医领域关于孤独症谱系障碍(Autism Spectrum Disorder,ASD)的现状,并以此预判其未来发展趋势。方法 从知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统这四个数据库中检索,时间为1997年1月至2021年11月,范围为中医领域内的ASD相关文献,并用NoteExpress进行查重、筛选及合并同类关键词,将最终数据导入CiteSpace与VOSviewer,将作者、年份、关键词等信息做可视化分析。结果 共纳入中文文献351篇,共包含801个作者。关键词共形成8个聚类标签,涉及治疗方式、治疗评价、并发症状及理论依据。根据现有的关键词及近年来关键词的变化方向分析现状及趋势。结论 通过知识图谱的可视化分析可以直观了解1997年之后我国中医领域内治疗ASD的状况,而未来将更侧重于疾病的机制与靶点的探讨,为各研究者明确研究热点与发展趋势,也为ASD的中医治疗提供参考。
    37  基于潜在类别结合隐结构分析的血脂异常患者中医常见证候特征研究
    李敏 何庆勇
    2022, 24(5):387-398. DOI: 10.11842/wst.20210607015
    [摘要](47) [HTML](18) [PDF 1.98 M](140)
    摘要:
    目的 探索基于潜在类别结合隐结构分析的血脂异常中医常见证候,为临床辨证提供依据。方法 多中心采集2013年1月至2016年9月1019例诊断为血脂异常患者的中医四诊信息,建立数据库。采用Mplus 8.3和Lantern 5.0软件,运用潜在类别和隐结构模型法分析法,对比分析血脂异常患者的中医常见证候、症状特征。结果 本研究选择发生率>10%的症状、体征,纳入显在变量指标34个,得到3个较为理想的数据拟合模型(BIC=37734.732)。通过潜在类别分析分为3类共6种主要病性证候要素:痰浊、气虚、血瘀、湿热、阴虚、气滞,病位证候要素以脾、肺、心、肝为主。另纳入患者的89个症状、体征建立隐结构模型,得到17个隐性变量;根据潜在类别、专家组意见,对隐性变量进行综合聚类,最终得到17个因变量、综合聚类为5个证候,包括阴阳两虚证、气滞血瘀证、痰浊阻滞证、气虚证、湿热内盛证,并初步确定了各证候的诊断要点。结论 基于潜在类别和隐结构模型分析发现血脂异常的中医常见证候为阴阳两虚证、气滞血瘀证、痰浊阻滞证、气虚证、湿热内盛证。通过建立数据模型,从显性变量中推导出隐性知识,为中医证候研究提供了新的思路,为中医治疗血脂异常的新药研发的提供了一定的科学基础。
    38  基于VOSviewer和CiteSpace分析功能性磁共振成像技术在针灸脑成像研究中的应用现状和趋势
    任欢 任玉兰 曾奕玮 张粟 刘彩娇 李思静
    2022, 24(5):399-409. DOI: 10.11842/wst.20210531006
    [摘要](52) [HTML](34) [PDF 3.07 M](145)
    摘要:
    目的 总结功能磁共振成像(functional magnetic resonance imaging, fMRI)技术在针灸脑成像研究中的应用发展历程和研究热点,为今后的研究提供新的见解。方法 从Web of Science数据库核心合集中下载2020年前关于针灸fMRI的文献。采用VOSviewer和CiteSpace软件进行文献计量学分析,主要包括机构间和作者间的合作分析、关键词的共现分析、关键词突发性探测和引文分析等。结果 共纳入了321篇文献,发文量随着时间的推移有逐渐增长的趋势。中国科学院(50篇)和西安电子科技大学(50篇)是目前核心研究机构,发文量最多的作者是田捷(35篇),影响力最高的作者是白丽君(0.55)。接受本研究领域文章最多的期刊是《循证补充与替代医学》。针灸fMRI研究中最常用的5个关键词是针灸、fMRI、电针、针刺镇痛、静息态fMRI,前沿话题是:默认模式网络(default mode network, DMN)、恢复和功能连接。结论 目前针灸fMRI研究仍然有很大的发展潜力,我国应加强与其他国家的合作;针灸fMRI的研究热点主要是针灸镇痛和经穴特应性研究,今后研究趋势主要是针灸对脑功能连通性的影响,尤其是边缘系统和DMN。今后为了保证研究结果的重复性和可靠性,应进一步加强研究设计和质量控制。
    39  基于藏医体质学与多中心调查数据的YM病(抑郁症)临床定位研究*
    党知卓玛 文成当智 仁增加 若尖加 华欠桑多 贡却坚赞
    2022, 24(5):410-421. DOI: 10.11842/wst.20220314005
    [摘要](53) [HTML](25) [PDF 4.82 M](124)
    摘要:
    目的 鉴于抑郁症已成为降低人们生活质量的影响因素且藏医对此病有较好的疗效,研究老年人抑郁症与藏医体质的关联,为藏医开展抑郁症的诊断和科研提供参考资料。方法 采用藏医体质辨识和老年抑郁量表(GDS)检测法,纳入青海省所属9个县60岁及以上共计573名不同性别、职业的藏族老年人进行藏医体质类型分布与抑郁状态调查,并对结果进行Spearman相关系数分析。结果 在573例调查对象中,七种藏医体质中各所占的比例分别为:综合型59.5%、隆赤型9.6%、培隆型9.6%、培赤型8.65%、赤巴型4.7%、隆型4.5%、培根型3.5%;抑郁症分为正常、轻度和重度抑郁,构成比例分别为37.5%、54.8%、和7.7%。不同藏医体质的抑郁症分型差异具有统计学意义(x=31.277, P=0.002);不同职业抑郁症分型情况具有统计学意义(x=22.907, P=0.001)。结论 YM病与藏医隆型体质存在一定的关联性,其中隆型体质为YM病的基础,三因中的隆是YM病发病的影响因素,心脏在YM病与隆之间发挥着中介作用。当存在于心脏的“遍行隆”所具有的轻和动的特性发生偏盛会引起隆性YM病;又如当索增隆和上行隆的功能紊乱时,使居于心脏的遍行隆受到影响也会引起隆性YM病;能作赤巴在遍行隆的协助下,诱发赤巴热和锐等特性时,导致赤巴紊乱产生高热而诱发热性YM病,故可将“平隆养心、安神镇静、营养脑神和活络通脉”作为YM病的预防原则,应用“隆助热亦助寒,寒热双入”的特征进行辨症施治,将藏医寒热症思想充分应用到YM病的治疗中,从而发挥藏医药辨证施治的优势,提高藏医治疗YM病的临床疗效。
    40  基于DTI评价急性缺血性脑卒中运动功能缺损程度与肾虚髓亏证的相关性研究
    朱巍明 刘伟 李鑫 姬琳 宗寿健 王振松
    2022, 24(5):422-435. DOI: 10.11842/wst.20210720019
    [摘要](62) [HTML](23) [PDF 11.87 M](195)
    摘要:
    目的 运用核磁共振弥散张量成像技术(DTI),从皮质脊髓束损伤程度评价的角度,探讨肾虚髓亏证与急性缺血性脑卒中运动功能缺损程度相关性,丰富中风病病机及证候诊断,拓宽缺血性脑卒中的中医药防治思路,为急性缺血性脑卒中肾虚髓亏证患者运动功能损伤程度提供临床依据,强调肾虚髓亏证在急性缺血性脑卒中运动功能损伤中的重要意义。方法 纳入符合诊断标准的90例病例,根据证候分别归入肾虚髓亏组和非肾虚髓亏组,每组各45例。每组患者均给予常规西药治疗。对两组患者入院后行弥散张量成像检测,同时分别于治疗前及治疗后14天,记录两组患者NIHSS评分、改良Barthel指数量表及简化Fugl-Meyer运动功能评分量表评分,比较两组病例发病时的轻重程度及治疗前后两组病例组间的恢复差异。结果 研究显示,治疗前肾虚髓亏组在NIHSS评分方面高于非肾虚髓亏组(P<0.05);治疗前肾虚髓亏组在改良Barthel指数量表及简化Fugl-Meyer运动功能评分方面低于非肾虚髓亏组(P<0.05)。治疗前后NIHSS评分、改良Barthel指数评分及简化Fugl-Meyer运动功能评分改善情况,非肾虚髓亏组要优于肾虚髓亏组(P<0.05)。治疗前两组患者在健侧内囊后肢及大脑脚外侧处FA值及ADC值无明显差异;肾虚髓亏组在患侧内囊后肢及大脑脚外侧处FA值及ADC值均低于非肾虚髓亏组(P<0.05)。相关性分析得出,两组患者患侧内囊后肢FA值与患者治疗前NIHSS评分呈负相关;两组患者患侧内囊后肢FA值与患者改良Barthel指数评分及简化Fugl-Meyer运动功能评分呈正相关;肾虚髓亏组患者患侧内囊后肢FA值与肾虚髓亏证中医证候评分呈负相关。结论 肾虚髓亏是急性缺血性脑卒中运动功能障碍的重要病机。研究结果显示,两组皮质脊髓束损伤程度与神经功能及运动功能损伤存在相关性,且肾虚髓亏组在皮质脊髓束的损伤程度方面与其中医证候评分呈负相关。
    41  基于社区发现算法的消渴六经证候研究
    刘畅 瞿溢谦 虞红蕾 杨帆 王平 李煜 曹灵勇 林树元
    2022, 24(5):436-446. DOI: 10.11842/wst.20211001001
    [摘要](82) [HTML](20) [PDF 3.28 M](199)
    摘要:
    目的 通过社区发现算法挖掘消渴病六经证候分布规律。方法 在已构建的消渴病经方古籍知识图谱基础上,对图结构数据进行症状及其关联的提取,运用Louvain算法进行社区发现,运用PageRank算法分析各社区中症状的主次。另采用因子分析方法进行证候挖掘,并对二者结果进行比较。结果 由社区发现得到4个社区,其六经证候分别为阳明病、阳明太阴合病、太阴病(水证)、太阴病(血证)。由因子分析得到10个公因子,六经证候为阳明病(X2、X4、X5、X7、X8),太阴病(X1、X9、X10)、阳明太阴合病(X3)。结论 基于社区发现的证候研究方法,可有效挖掘古籍中消渴病的六经证候规律,其结果在专业上具备较强的可解释性。
    42  青蒿素资源保障策略及影响因素研究进展
    2022, 24(5):1716-1728. DOI: 10.11842/wst.20220216008
    [摘要](50) [HTML](37) [PDF 3.46 M](125)
    摘要:
    青蒿素来自菊科植物黄花蒿,属于含过氧桥结构的倍半萜类化合物,是抗疟一线药物。天然产物是新药研发的重要资源,随着青蒿素及其衍生物新药研究的发展,青蒿素的需求量日益增加,因此保障青蒿素资源具有重要战略意义。本文从天然产物生物合成保障、合成生物学保障和化学合成保障方面综述青蒿素资源保障策略,同时从中药天然产物提取和人工合成途径综合分析青蒿素的来源和不同环节的影响因素,以推动青蒿素工业化生产和新药开发。该策略为青蒿素资源可持续利用提供理论基础和方法指导,对其他重要天然产物如紫杉醇等资源保障研究具有重要参考价值。
    43  中药活性成分治疗糖尿病及其并发症的研究进展
    尚杰 刘淼 梁洋 滕春波
    2022, 24(5):1729-1737. DOI: 10.11842/wst.20211119010
    [摘要](50) [HTML](43) [PDF 1.81 M](139)
    摘要:
    糖尿病是血糖长期处于较高水平的代谢紊乱疾病,并伴随产生糖尿病肾病、心肌病变、眼部病变、神经病变等并发症。近年来随着民众生活水平提高,糖尿病患者逐年增多,医疗花费也随之增加。治疗糖尿病的药物研发成为近年来的研究热门,其中治疗1型糖尿病侧重于缓释胰岛素,治疗2型糖尿病则侧重糖脂代谢。大量研究表明,中药中的活性成分可有效治疗糖尿病及其并发症,且药效温和,副作用较小。本文主要介绍目前中药活性成分中研究较多的多糖类、多酚类、生物碱类等活性物质在降糖、提高胰岛素敏感性、抗炎及抗氧化等方面的研究进展,为利用中药活性成分治疗糖尿病及其并发症提供参考。
    44  炭角菌属次生代谢产物及药理活性研究进展
    韩海燕 段应策 彭爽 祁建钊 刘成伟
    2022, 24(5):1738-1750. DOI: 10.11842/wst.20211109005
    [摘要](35) [HTML](20) [PDF 2.46 M](144)
    摘要:
    炭角菌属是子囊菌门炭角菌科的一种药用真菌,广泛分布于温带、热带和亚热带地区。其性温、味微苦,具有提高机体免疫力、抗衰老、延长寿命等功效,对心悸失眠、镇惊安神及散瘀止血等有一定功效。除此之外,炭角菌具有丰富的次生代谢产物,且具有良好的生物活性,是药物开发的重要宝库。近5年从炭角菌中共发现了136种次生代谢产物,主要包括细胞松弛素、萜类、生物碱和聚酮类等化学成分,现代研究表明这些化合物具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化和改善睡眠等作用。本文总结了近年来国内外有关炭角菌属次生代谢产物及生物活性研究进展,以期为炭角菌属的深入研究和合理开发利用提供科学依据。

    当期目录


    年第卷第

    文章目录

    过刊浏览

    年份

    刊期

    浏览排行

    引用排行

    下载排行