2022, 24(7):228-234.
DOI: 10.11842/wst.20210917003
摘要:
目的 在细胞模型中研究白芍总苷抗非酒精脂肪肝的作用机制。方法 采用油酸干预HepG2细胞构建脂肪肝细胞模型，油红O染色观察细胞内脂肪滴。采用CCK-8检测白芍总苷对细胞增殖能力的影响，并筛选出最佳的作用浓度和作用时间。将细胞分为4组：对照组、模型组、白芍总苷预处理组和治疗组。生化实验检测细胞总胆固醇（total cholesterol， TC）、甘油三酯（triglyceride， TG）、丙二醛（malondialdehyde， MDA）含量及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase， GSH-Px）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase， ALT）活性。透射电子显微镜观察细胞线粒体的超微结构。Real-time PCR检测细胞酰基辅酶A氧化酶1（acyl coenzyme A oxidase1， ACOX1）基因表达水平。Western blot检测细胞线粒体融合蛋白1（Mitofusin 1， Mfn1）、线粒体融合蛋白2（Mitofusin 2， Mfn2）、视神经萎缩蛋白1（Optic atrophy 1， Opa1）和发动蛋白相关蛋白1（Dynamin-related protein 1， Drp1）表达水平。结果 成功构建脂肪肝细胞模型，筛选出白芍总苷的最佳的作用浓度为80 μg/mL，作用时间为24 h。与对照组比较，模型组TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著升高（P<0.05），GSH-Px活性显著降低（P<0.05），线粒体肿胀，嵴稀疏、断裂、溶解，逐渐空泡化，ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著降低（P<0.05），Drp1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与模型组比较，白芍总苷预处理组和治疗组细胞TC、TG、MDA浓度及ALP和ALT活性均显著降低（P<0.05），GSH-Px活性显著升高（P<0.05），大部分线粒体膜结构较为完整，嵴结构清晰且紧密排列，ACOX1 mRNA和Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达水平显著升高（P<0.05），Drp1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论 白芍总苷对脂肪肝具有较好的防治作用，其作用机制与改善线粒体损伤，保护线粒体功能有关。
